Các Sự khác biệt chính giữa điện di trên gel và SDS PAGE là điện di gel là một kỹ thuật được sử dụng để tách DNA, RNA và protein trong khi SDS PAGE là một loại điện di trên gel được sử dụng chủ yếu để tách protein. Nói chung, SDS PAGE cho độ phân giải tốt hơn so với điện di trên gel thông thường.

Điện di trên gel và SDS PAGE là các kỹ thuật trong công nghệ sinh học giúp phân tách các đại phân tử dựa trên điện tích và kích thước. Thông thường, điện di trên gel sử dụng chất đâm gel agarose để tách trong khi SDS PAGE sử dụng chất đâm gel polyacrylamide.

Các lĩnh vực chính được bao phủ

1. Điện di Gel là gì - Định nghĩa, Thủ tục, Tầm quan trọng 2. TRANG SDS là gì - Định nghĩa, Thủ tục, Tầm quan trọng 3. Điểm giống nhau giữa điện di trên gel và trang SDS - Sơ lược các tính năng chung 4. Sự khác biệt giữa điện di trên gel và trang SDS - So sánh các điểm khác biệt chính

Thuật ngữ chính: Agarose, DNA, Điện di trên gel, Polyacrylamide, Protein, TRANG SDS

Điện di trên Gel là gì

Điện di trên gel là một kỹ thuật tách các đoạn của các đại phân tử như DNA, RNA và protein dựa trên kích thước và điện tích của chúng. Trong quá trình điện di trên gel, các đại phân tử di chuyển dưới ảnh hưởng của điện trường trên nền gel, trong đó có các lỗ rỗng mà các đại phân tử di chuyển qua đó. Điện di trên gel là kỹ thuật tổng hợp phân tích DNA từ kỹ thuật PCR, RFLP, nhân bản, giải trình tự DNA hoặc thấm. Các hạt nano cũng có thể được phân tách bằng điện di trên gel. Gel đâm được chuẩn bị từ một polysaccharide gọi là agarose có nguồn gốc từ rong biển. Gel agarose bao gồm các phân tử agarose chuỗi dài liên kết với nhau như một mạng nhện. Video 1 mô tả việc chuẩn bị gel agarose.

Cả DNA và RNA đều chứa các nhóm phosphate ở mỗi nucleotide đơn phân của chúng. Do đó, chúng có điện tích âm bằng nhau trong toàn bộ phân tử. Hơn nữa, chúng di chuyển về phía điện cực dương dưới điện trường. Tốc độ di chuyển phụ thuộc vào kích thước của axit nucleic. Các phân tử ngắn hơn di chuyển nhanh hơn qua các lỗ chân lông trong khi các phân tử lớn hơn thì mất một thời gian.

Hình 1: Các dải DNA trên Gel Agarose

TRANG SDS là gì

SDS PAGE (điện di trên gel natri dodecyl sulfat-polyacrylamide) là một kỹ thuật phân tích được sử dụng để tách các phân tử tích điện dựa trên kích thước. Trong quá trình này, SDS được sử dụng để phân lập protein bằng cách làm biến tính chúng. Vì SDS là chất tẩy rửa; cấu trúc bậc ba của protein bị nó phá vỡ, đưa protein gấp khúc xuống thành một phân tử mạch thẳng. Ngoài ra, nó phủ lên phân tử protein tuyến tính đó một điện tích âm đồng nhất. SDS PAGE bao gồm hai gel với các nồng độ khác nhau. Lớp trên cùng được gọi là gel xếp chồng lên đó các mẫu được tải trong khi lớp dưới cùng được gọi là gel phân giải. Nồng độ polyacrylamide của gel xếp chồng là 3,5-4% (kích thước lỗ lớn) và nó tập trung các protein trong một dải. Nồng độ polyacrylamide trong gel phân giải là 4-20% (kích thước lỗ nhỏ) và nó phân tách các protein dựa trên kích thước của chúng. Đoạn video 2 cho thấy việc chuẩn bị một TRANG SDS.

SDS PAGE cung cấp khả năng phân tách nhanh chóng các protein, hỗ trợ quá trình phân tích tiếp theo, chẳng hạn như Western blotting.

Hình 2: Các dải protein trên SDS PAGE

Vì khả năng phân giải của SDS PAGE cao hơn gel agarose thông thường, SDS PAGE giúp tách các đoạn DNA nhỏ có kích thước 5-500 bp.

Điểm giống nhau giữa điện di trên gel và trang SDS

Sự khác biệt giữa điện di trên gel và trang SDS

Sự định nghĩa

Điện di trên gel: Kỹ thuật được sử dụng để tách các đoạn của đại phân tử như DNA, RNA và protein dựa trên kích thước và điện tích của chúng

TRANG SDS: Một kỹ thuật phân tích được sử dụng để tách các phân tử tích điện dựa trên kích thước

Thành phần

Điện di trên gel: Bằng nhau trong toàn bộ gel; tạo thành từ agarose

TRANG SDS: Hai loại gel với nồng độ khác nhau; được tạo thành từ polyacrylamide

Chạy cấu hình

Điện di trên gel: Chạy ngang

TRANG SDS: Chạy dọc

Phương pháp đúc

Điện di trên gel: Đặt khi nó nguội đi

TRANG SDS: Thiết lập bởi một phản ứng hóa học

Kích thước lỗ chân lông

Điện di trên gel: Kích thước lỗ chân lông không đồng đều; nồng độ agarose cao hơn, kích thước lỗ nhỏ hơn

TRANG SDS: Kích thước lỗ chân lông đồng đều; tỷ lệ acrylamide so với bis-acrylamide xác định kích thước lỗ chân lông

Nồng độ

Điện di trên gel: 0.5-2%

TRANG SDS: 6-15%

Tách biệt

Điện di trên gel: 50-20, 000 axit nucleic bp

TRANG SDS: 5-250, 000 Da protein

Điều kiện

Điện di trên gel: Nói chung chạy trong điều kiện gốc

TRANG SDS: Điều kiện biến tính

Sự chuẩn bị

Điện di trên gel: Đơn giản

TRANG SDS: Một quá trình phức tạp

Nhuộm màu

Điện di trên gel: Với ethidium bromide

TRANG SDS: Nhuộm Coomassie hoặc nhuộm bạc

Phần kết luận

Điện di trên gel là một kỹ thuật phân tích tách các đại phân tử như DNA, RNA và protein dựa trên kích thước của chúng. SDS PAGE là một loại điện di trên gel chủ yếu được sử dụng để tách protein trong điều kiện biến tính. SDS PAGE có khả năng phân giải cao hơn khi so sánh với điện di trên gel thông thường. Sự khác biệt chính giữa điện di trên gel và SDS PAGE là loại đại phân tử được tách ra và quy trình của chúng.

Thẩm quyền giải quyết:

1. “Điện di trên gel.” Học viện Khan, có sẵn tại đây2. “Điện di trên gel SDS Polyacrylamide (SDS-PAGE).” Viện Diamantina, ngày 26 tháng 4 năm 2017, có sẵn tại đây

Hình ảnh lịch sự:

1. “Điện di trên gel 2” Von Mnolf - Ảnh chụp tại Innsbruck, Áo (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia 2. “Coomassie3” của Yikrazuul - Tác phẩm riêng (CC BY-SA 3.0) qua Commons Wikimedia